本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，以包被于酶標板的大鼠NT-4特異性抗體為固相捕獲抗體。待測樣本、標準品中的NT-4抗原可被固相抗體特異性捕獲，洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入酶標記的NT-4特異性檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫復合物。后續(xù)經(jīng)顯色、終止、吸光度檢測步驟，結(jié)合標準曲線的濃度梯度關(guān)系，精準測定大鼠樣本中NT-4的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1644 |
英文名稱 | NT-4 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度0.2ng/mL，微量NT-4可精準定量。
檢測范圍：0.5ng/mL - 100ng/mL，適用于大鼠腦、脊髓、外周神經(jīng)組織及血清樣本。
反應時間：全程95分鐘，37℃樣本溫育40分鐘、酶結(jié)合物溫育30分鐘、顯色25分鐘。
保存條件：2-8℃冷藏避光，所有試劑組分嚴禁冷凍結(jié)冰。
有效期：未開封有效期12個月，多次取用后1個月內(nèi)用完。
特異性：特異性識別大鼠NT-4，不與NT-3、BDNF發(fā)生交叉免疫反應。
重復性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%，批次檢測一致性高。
注意事項：神經(jīng)組織取材后立即低溫保存，防止NT-4蛋白快速降解。
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
試劑盒室溫靜置 34min，配比稀釋洗滌液，梯度稀釋 NT-4 標準品，標記酶標板各類孔位，待測細胞培養(yǎng)上清提前分裝備用。
標準品孔添加 NT-4 梯度標準液 50μL，樣本孔加入待測上清樣本 50μL，空白孔加基礎(chǔ)稀釋液 50μL，每孔加入酶結(jié)合工作液 100μL，封板膜封閉。
37℃避光孵育 64min，完成抗原抗體夾心結(jié)合。
掀開封膜倒掉孔內(nèi)液體，洗滌液加滿浸泡 31s，重復洗板 6 次，吸水紙徹底拍干板條。
每孔依次滴加顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 18min。
逐孔添加終止液 50μL 終止顯色，輕微振蕩酶標板混勻反應液。
酶標儀 450nm 檢測 OD 值，依托標準曲線得出 NT-4 檢測濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4;NT-4;ELISA試劑盒;
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