本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被大鼠ADH特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品及大鼠待測(cè)生物樣本后，樣本中的乙醇脫氫酶抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合，洗板去除游離成分，加入酶標(biāo)記ADH檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，形成固相抗體-ADH抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止液終止反應(yīng)后，吸光度數(shù)值與樣本中ADH濃度成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合即可定量檢測(cè)大鼠樣本中乙醇脫氫酶的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒
英文名稱：ADH ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1084
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.2U/L
檢測(cè)范圍：0.5U/L - 60U/L
反應(yīng)時(shí)間：全程100分鐘（樣本孵育40min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：試劑盒2-8℃冷藏，顯色液、終止液室溫密封保存
有效期：未開封儲(chǔ)存有效期12個(gè)月
特異性：特異性結(jié)合大鼠乙醇脫氫酶，與乙醛脫氫酶、其他氧化還原酶無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%
注意事項(xiàng)：組織樣本需充分勻漿、離心取上清；避免酒精污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境，干擾酶活性檢測(cè)；試劑混勻輕柔，避免起泡
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒常溫平衡 30min，稀釋濃縮洗滌液，配制 ADH 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，酶標(biāo)板分孔標(biāo)記實(shí)驗(yàn)組別。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入不同濃度 ADH 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測(cè)孔加入 50μL 大鼠組織勻漿上清樣本，空白孔不加液。
全部檢測(cè)孔添加一步法酶偶聯(lián)物工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 60min。
揭膜棄液，洗滌液加滿微孔靜置 40s 后甩干，循環(huán)洗板 5 次，徹底去除游離反應(yīng)物。
每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 15min。
每孔滴加終止液 50μL 終止顯色，水平晃動(dòng)混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量樣本乙醇脫氫酶 ADH 水平。
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關(guān)鍵字： 大鼠乙醇脫氫酶;ADH;ELISA試劑盒;
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