本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理，將純化的大鼠ALDH特異性抗體固定于酶標(biāo)板微孔作為固相捕獲抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和大鼠待測(cè)樣本，樣本中的乙醛脫氫酶與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌純化后加入酶標(biāo)記ALDH檢測(cè)抗體，孵育形成特異性免疫復(fù)合物，底物顯色后，顯色強(qiáng)度隨樣本中ALDH含量升高而增強(qiáng)，通過酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)測(cè)定樣本中ALDH的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒
英文名稱：ALDH ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1085
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.18U/L
檢測(cè)范圍：0.4U/L - 50U/L
反應(yīng)時(shí)間：全程100分鐘（樣本孵育40min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：2-8℃避光冷藏，開封試劑1個(gè)月內(nèi)用完
有效期：未開封儲(chǔ)存有效期12個(gè)月
特異性：精準(zhǔn)識(shí)別大鼠乙醛脫氫酶各亞型，與乙醇脫氫酶無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤5%，板間變異系數(shù)CV≤7%
注意事項(xiàng)：樣本采集后低溫保存，防止酶蛋白變性；孵育溫度恒定37℃，禁止高低溫交替；洗滌液需完全覆蓋微孔，保證洗滌效果
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 25min，配比洗滌工作液，梯度稀釋 ALDH 標(biāo)準(zhǔn)品，酶標(biāo)板編號(hào)區(qū)分空白、標(biāo)準(zhǔn)、待測(cè)樣本。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 ALDH 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入 50μL 大鼠細(xì)胞裂解上清液，空白孔無(wú)添加。
非空白孔加入一步法酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，密封封板，37℃孵育 48min。
倒掉孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡每孔 35s 后甩干，洗板 4 次，拍干微孔殘留液體。
每孔加顯色 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 13min。
加入終止液 50μL 終止反應(yīng)，震蕩酶標(biāo)板混勻。
450nm 波長(zhǎng)檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算乙醛脫氫酶 ALDH 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠乙醛脫氫酶;ALDH;ELISA試劑盒;
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