本試劑盒基于間接酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,微孔板固相包被腺病毒特異性抗原,加入待測樣本及標準品后,樣本中的ADV-IgM抗體與固相抗原發(fā)生特異性結合,孵育洗滌除去游離雜質(zhì),加入辣根過氧化物酶標記的抗人IgM抗體進行特異性結合反應,底物顯色后終止反應,檢測各孔吸光度數(shù)值,依據(jù)標準曲線精準測定樣本中ADV-IgM抗體的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E607 |
英文名稱 | ADV-IgM Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低陽性檢出稀釋比例 1:100
檢測范圍:血清稀釋梯度 1:50~1:1600
反應時間:樣本孵育 115min,酶結合二抗 72min,避光顯色 23min
保存條件:試劑盒 2-8℃,陰陽性對照避免反復凍融
顯色系統(tǒng):雙組分 TMB 顯色體系
檢測波長:450nm 單波長檢測
標準曲線繪制:設置 cutoff 臨界值,OD 大于閾值判定 IgM 陽性,無定量標準曲線
注意事項:血清中類風濕因子會造成假陽性,建議使用 RF 吸附預處理樣本
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑盒室溫平衡 30min,配置一步法包被抗原酶標記液,標記各組孔位。
每孔預加酶工作液 55μL,對照孔加陰陽性質(zhì)控品 45μL,樣本孔加稀釋血清 45μL,空白孔加緩沖液 45μL。
封板 37℃孵育 66min,甩凈孔內(nèi)液體,洗板 6 次,每次浸泡 31s,拍干殘留洗液。
每孔加入 TMB 顯色液 100μL 混勻。
避光 37℃顯色 18min。
滴加終止液 50μL 終止顯色。
450nm 讀數(shù),根據(jù)臨界值判讀 ADV-IgM 結果。
關鍵字: 人腺病毒IgM;ADV-IgM;ELISA試劑盒;
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