本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫檢測(cè)原理，以包被于酶標(biāo)板的EB病毒特異性抗原為固相載體，加入待測(cè)血清樣本，樣本內(nèi)EBv IgM抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗滌去除非特異性結(jié)合成分后，加入HRP標(biāo)記的抗人IgM抗體進(jìn)行孵育，結(jié)合形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，經(jīng)顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，精準(zhǔn)檢測(cè)樣本中EBv IgM抗體水平，用于判定EB病毒近期急性感染。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒
英文名稱：EBv IgM Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E601
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：早期感染檢出靈敏度≥96%，可捕捉EB病毒急性感染早期IgM抗體
檢測(cè)范圍：0.15AU/mL - 90AU/mL，適配急性感染窗口期樣本檢測(cè)
反應(yīng)時(shí)間：實(shí)驗(yàn)總時(shí)長(zhǎng)140分鐘，延長(zhǎng)溫育時(shí)間保障低滴度抗體結(jié)合
保存條件：2-8℃低溫避光保存，抗體試劑避免反復(fù)開(kāi)合暴露空氣
有效期：標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存條件下有效期12個(gè)月
特異性：特異性結(jié)合EB病毒IgM抗體，無(wú)同類病毒抗體交叉反應(yīng)，特異性極高
重復(fù)性：實(shí)驗(yàn)重復(fù)準(zhǔn)確率≥97%，變異系數(shù)＜7%
注意事項(xiàng)：類風(fēng)濕因子陽(yáng)性樣本需預(yù)處理，避免假陽(yáng)性；樣本禁止反復(fù)凍融，防止抗體降解
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說(shuō)明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒所有組分室溫放置 35min，稀釋濃縮洗滌液；EBv IgM 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶稀釋梯度，待測(cè)血清預(yù)處理去除脂血雜質(zhì)。
酶標(biāo)板設(shè)定空白、標(biāo)品、樣本孔，每孔加樣 100μL，空白孔補(bǔ)稀釋液。
一步法加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgM 抗體工作液 100μL，混勻封板。
37℃避光孵育 62min。
洗板 5 次，每次洗滌液浸潤(rùn) 30s 后倒扣拍凈孔內(nèi)液體。
加入顯色 A、B 液各 50μL，室溫避光顯色 16min。
終止液終止顯色，酶標(biāo)儀讀數(shù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 EBv IgM 水平。
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關(guān)鍵字： 人EB病毒IgM;EBv IgM;ELISA試劑盒;
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