本試劑盒基于雙抗體夾心免疫酶標原理，預先在酶標板微孔包被純化的人再生基因蛋白IV特異性抗體，加入標準品和待測樣本后，樣本中的REG-4抗原與固相抗體特異性結合，洗板去除未結合成分，隨后加入HRP標記的REG-4檢測抗體，形成固相抗體-抗原-酶標抗體復合物，顯色反應后OD值與REG-4含量正相關，通過標準曲線即可定量檢測樣本中REG-4蛋白濃度。
基本參數(shù)?：
產品名稱：人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒
英文名稱：REG-4 ELISA Kit
貨號：Y-E2574
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢測限 0.1ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL - 12.5ng/mL
反應時間：抗原捕獲 40min，二抗結合 40min，顯色 14min
保存條件：2-8℃避光保存，板條剩余部分連同干燥劑密封冷藏
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色液，無需配比
檢測波長：450nm 為主波長，650nm 參考
標準曲線繪制：設置空白對照孔，扣除本底后繪制標準曲線
注意事項：糞便提取樣本需充分過濾雜質，防止微孔板堵孔
關鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫回溫 30min，梯度稀釋 REG-4 標準品，細胞培養(yǎng)上清樣本稀釋，標注酶標板標準孔、樣本孔、空白孔。
按規(guī)定體積加樣，空白孔加稀釋緩沖液，標準孔加不同濃度 REG-4 標準液，樣本孔加入待測上清。
直接向全部微孔加入酶標抗體工作液，無需前置孵育洗板，輕板混勻液體。
封板密封后置于 37℃恒溫箱避光孵育 65min，板體平放無擠壓。
撕掉封板倒掉液體，洗板液加滿微孔浸泡 30s，連續(xù)洗板 5 次并拍干。
避光加入顯色底物，室溫避光顯色 16min，根據(jù)標準品顯色梯度判斷終止節(jié)點。
終止液終止顯色，酶標儀 450nm 測 OD 值，換算得到樣本 REG-4 蛋白濃度。
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關鍵字： 人再生基因蛋白IV;REG-4;ELISA試劑盒;
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