本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，酶標板微孔預先包被人脂氧素A4固相抗原，檢測時將待測樣本、梯度標準品與定量特異性一抗同步加入微孔，樣本中的LXA4與固相抗原競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點，孵育反應后洗滌，加入HRP標記二抗進行結(jié)合反應，再次洗滌后底物顯色、終止反應，樣本中LXA4含量越高，顯色越淺，通過檢測OD值并擬合標準曲線，可精準定量樣本中脂氧素A4的濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒

英文名稱：LXA4 ELISA Kit
貨號：Y-E2635

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢出下限 0.04pg/mL

檢測范圍：0.08pg/mL - 5.12pg/mL

反應時間：全程避光操作，孵育 65min、55min，顯色 18min

保存條件：全程 2-8℃避光，底物液必須遮光存放

顯色系統(tǒng)：避光型 TMB 顯色體系，強光會造成底物失效

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：全程避光加樣，空白孔避光處理后擬合標準曲線

注意事項：脂氧素極易光解，加樣、孵育、顯色全程遮光，操作速度盡量加快
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒避光室溫平衡 30min，避光梯度稀釋 LXA4 標準品，血漿樣本避光稀釋預處理，避光標記酶標板。

弱光環(huán)境下加樣，空白孔加避光稀釋液，標準孔加梯度 LXA4 標準品，樣本孔加入待測血漿。

弱光下直接加入酶標記抗體工作液，輕晃酶板混勻，全程避免強光直射。

避光封板密封，37℃暗盒孵育 65min，杜絕光照導致底物分解。

弱光下棄廢液，避光洗板液洗板 5 次，每次浸泡 30s，拍干微孔。

全程避光加入顯色底物，暗環(huán)境顯色 17min，不開啟環(huán)境光源。

避光添加終止液終止反應，快速上機 450nm 讀數(shù)，計算 LXA4 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：