本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)原理，酶標(biāo)板微孔固定人腫瘤血管生長因子特異性捕獲抗體，加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本后，樣本中的TAF與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入HRP標(biāo)記的TAF檢測抗體，構(gòu)建固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，顯色深淺與TAF含量成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量樣本中目標(biāo)因子濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒
英文名稱：TAF Elisa Kit
貨號：Y-E275
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢測限 0.09ng/mL
檢測范圍：0.18ng/mL - 11.52ng/mL
反應(yīng)時間：一抗 34min，二抗 34min，顯色 12min
保存條件：2-8℃避光，剩余板條必須密封防潮
顯色系統(tǒng)：TMB 雙液配比顯色體系
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)模型繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，適配寬濃度梯度樣本
注意事項：組織灌注液樣本需過濾去除微小組織碎屑，避免吸附微孔板
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫放置 29min，梯度稀釋 TAF 標(biāo)準(zhǔn)品，腫瘤組織勻漿上清稀釋制備待測液，標(biāo)注酶標(biāo)板微孔類型。
向空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本孔精準(zhǔn)加樣，統(tǒng)一加樣體積，避免液體掛壁損耗。
直接向全部微孔加入酶標(biāo)記抗體工作液，低速震蕩混勻 10s。
封板膜密封酶標(biāo)板，37℃恒溫避光孵育 64min，避光環(huán)境孵育。
倒掉孔內(nèi)廢液，洗板液洗板 4 次，每次浸泡 35s，吸水紙吸干微孔殘留洗滌液。
避光滴加 TMB 顯色液，37℃避光顯色 15min，觀察顯色梯度區(qū)分度。
終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 TAF 含量。
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關(guān)鍵字： 人腫瘤血管生長因子;TAF;ELISA試劑盒;
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