本試劑盒依托競(jìng)爭(zhēng)法ELISA檢測(cè)原理，微孔板包被有TX-A2特異性固相抗原，加入待測(cè)樣本和梯度標(biāo)準(zhǔn)品，同時(shí)加入酶標(biāo)記特異性抗體，樣本中的TX-A2與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)抗體，孵育完成免疫結(jié)合反應(yīng)后，洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)，加入顯色底物進(jìn)行酶促顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中TX-A2濃度呈負(fù)相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量樣本中TX-A2的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低可測(cè) 12pg/mL

檢測(cè)范圍：50~3200pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：競(jìng)爭(zhēng)法孵育 65min，酶結(jié)合物 35min，顯色 19min，總 119min

保存條件：2~8℃冷藏，工作液現(xiàn)配現(xiàn)用不可隔夜留存

顯色系統(tǒng)：A+B 混合 TMB 顯色，硫酸終止

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：競(jìng)爭(zhēng)抑制法，四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線

注意事項(xiàng)：血栓素極易降解，樣本需低溫抗凝并立即檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說(shuō)明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

抗凝血漿樣本稀釋：采集抗凝血漿快速稀釋，混勻室溫靜置 5min；試劑盒試劑室溫復(fù)溫 30min。

加樣封板孵育：各孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)血漿與酶結(jié)合液，封板 37℃孵育 60min。

洗板操作：棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡 30s，洗板 5 次，拍干微孔。

底物顯色：加入顯色 A、B 液，避光混勻，37℃顯色 14min。

終止液終止反應(yīng)：準(zhǔn)時(shí)加終止液混勻體系。

酶標(biāo)儀測(cè) OD：450nm 檢測(cè)吸光度數(shù)值并記錄。

數(shù)據(jù)換算：依托標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 TX-A2 樣本實(shí)際濃度。