本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔固相固定有抗人組織相容性2-K1-K區(qū)（H2-K1）特異性抗體。檢測過程中，樣本與標準品中的H2-K1抗原與固相抗體特異性結(jié)合，經(jīng)洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入HRP標記的H2-K1配對檢測抗體，形成特異性免疫夾心復(fù)合物。隨后加入TMB顯色底物進行酶促反應(yīng)，底物顯色程度隨樣本中H2-K1抗原含量升高而加深，終止反應(yīng)后通過酶標儀檢測吸光度，結(jié)合標準曲線即可精準測定樣本中H2-K1的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒

英文名稱：H2-K1 ELISA Kit
貨號：Y-E2591

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢測下限 0.2ng/mL

檢測范圍：0.4ng/mL～18ng/mL

反應(yīng)時間：室溫樣本孵育 55min，酶標試劑 40min，底物顯色 16min，終止檢測，合計 111min

保存條件：試劑盒 2～8℃儲存，微孔板條拆開后密封防潮冷藏，洗滌濃縮液室溫保存無有效期限制

顯色系統(tǒng)：A、B 液混合式 TMB 顯色

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：7 個濃度梯度標準品，線性擬合標準曲線，R2 要求大于 0.99 方可使用

注意事項：避免強光直射試劑盒組分；樣本稀釋比例嚴格按照說明書，不可隨意更改稀釋倍數(shù)。
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫放置 32min 平衡溫度，稀釋洗滌液，梯度配制 H2-K1 標準品稀釋系列。

酶標板分孔加入標準品、待測細胞上清樣本、空白稀釋液，精準定容加樣。

直接添加酶偶聯(lián)檢測液，封板后 37℃濕盒避光孵育 65min。

棄除孔內(nèi)廢液，洗板 4 次，每次加滿洗滌液靜置 30s，徹底拍干。

加入 TMB 顯色液，遮光條件下顯色 17min。

滴加終止液終止酶促反應(yīng)，震蕩混勻微孔板。

酶標儀讀取吸光度，依據(jù)標準曲線計算 H2-K1 表達量。
公司正在出售的產(chǎn)品：