本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理,酶標(biāo)板微孔固相包被人MHCⅠ類(lèi)分子特異性捕獲抗體,加入標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)樣本后,樣本中的主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)抗原與固相抗體特異性結(jié)合,孵育洗滌后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物,經(jīng)顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)OD值,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量檢測(cè)樣本中MHCⅠ的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱(chēng):人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):Y-E2870
貨號(hào):MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最小檢測(cè) 0.32ng/mL
檢測(cè)范圍:0.64ng/mL - 40.96ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:一抗 37min,二抗 37min,顯色 14min
保存條件:2~8℃避光保存,剩余板條密封防潮
顯色系統(tǒng):OPD 底物顯色,硫酸終止測(cè)值
檢測(cè)波長(zhǎng):490nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:線(xiàn)性回歸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),適用于免疫分型批量檢測(cè)
注意事項(xiàng):淋巴細(xì)胞樣本避免溶血,紅細(xì)胞碎片會(huì)干擾 MHC 分子結(jié)合
儲(chǔ)存與有效期:

未開(kāi)封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫回溫 35min,梯度稀釋 MHCⅠ 標(biāo)準(zhǔn)品,外周血淋巴細(xì)胞上清稀釋預(yù)處理,弱光標(biāo)記酶標(biāo)板微孔。
無(wú)菌環(huán)境下加樣,空白孔加無(wú)菌稀釋緩沖液,標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度 MHCⅠ 標(biāo)準(zhǔn)品,樣本孔加入待測(cè)淋巴細(xì)胞上清。
直接向全部微孔加入酶標(biāo)記抗 HLAⅠ 抗體工作液,輕晃酶板混勻體系,無(wú)菌操作避免雜蛋白干擾。
無(wú)菌封板密封,37℃避光孵育 72min,延長(zhǎng)孵育提升結(jié)合特異性。
棄除廢液,無(wú)菌洗板液洗板 6 次,每次浸泡 30s,充分拍干微孔內(nèi)洗液。
避光無(wú)菌環(huán)境添加顯色底物,37℃避光顯色 19min,顯色穩(wěn)定后終止。
終止液終止顯色,酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù),標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算 MHCⅠ 分子表達(dá)量。
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關(guān)鍵字: 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi);MHCⅠ/HLAⅠ;ELISA試劑盒;
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