本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔包被有大鼠MHCⅠ特異性捕獲抗體。檢測孵育時,待測樣本、標準品中的大鼠MHCⅠ抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗板去除未結(jié)合雜質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的MHCⅠ檢測抗體,形成夾心式免疫復合物。經(jīng)TMB底物顯色、酸性終止液終止反應后,微孔溶液吸光度值與樣本中MHCⅠ含量呈正相關,結(jié)合標準曲線可精準定量大鼠樣本中該復合體的表達水平。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1387 |
英文名稱 | MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤1.0ng/mL
檢測范圍:2ng/mL - 180ng/mL
反應時間:總反應130分鐘(孵育70min、酶反應30min、顯色30min)
保存條件:2-8℃避光冷藏,試劑開封后密封存放
有效期:12個月
檢測波長:450nm/630nm雙波長檢測
標準曲線繪制:六梯度標準品擬合曲線,R2≥0.991
注意事項:免疫樣本需新鮮處理,避免抗原失活,保證結(jié)合效率
關鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
1. 濃縮洗滌液配制工作液,試劑室溫平衡 29min,待測淋巴細胞裂解上清離心除雜,標記酶標板分組孔。
2. 標準品孔加入梯度 MHCⅠ 標準品 50μL,樣本孔上樣 50μL 待測裂解液,空白孔添加稀釋緩沖液。
3. 每孔加入酶標記工作液 100μL,封板膜密封,混勻后 37℃孵育 63min。
4. 洗板 5 次,洗滌液浸泡 30s / 次,棄液后吸水紙拍干。
5. 避光添加顯色 A、B 液各 50μL,輕微震蕩,37℃避光顯色 16min。
6. 加入終止液 50μL / 孔,搖晃混勻終止顯色。
7. 450nm 檢測吸光值,換算樣本 MHCⅠ 表達量。
關鍵字: 大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類;MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ;ELISA試劑盒;
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