本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔預(yù)先包被抗人Try-Ⅱ特異性抗體,加入梯度標準品和待測胰組織、血清樣本,樣本中的Try-Ⅱ抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合物質(zhì),加入酶標記Try-Ⅱ檢測抗體形成免疫復(fù)合物,二次洗滌后加入顯色底物顯色,終止反應(yīng)后測定吸光度,顯色深淺與Try-Ⅱ含量成正比,可精準定量樣本中Try-Ⅱ濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E993 |
英文名稱 | Try-Ⅱ Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測 0.1ng/mL
檢測范圍:0.5~32ng/mL
反應(yīng)時間:樣本孵育 60min,酶二抗 40min,顯色 17min,總 117min
保存條件:2~8℃冷藏,洗滌液結(jié)晶溫水融化后使用不影響效果
顯色系統(tǒng):OPD 底物顯色,硫酸終止
檢測波長:492nm 檢測,620nm 扣除背景
標準曲線繪制:七點倍比稀釋,四參數(shù)擬合校準曲線
注意事項:胰腺炎樣本極易降解,采集后立即分裝凍存
關(guān)鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
血清 / 胰液樣本稀釋:樣本稀釋液稀釋待測樣品,渦旋混勻,室溫靜置 8min;試劑室溫平衡 28min。
一步法共加樣孵育:空白、標準、樣本孔加樣與酶工作液,封板 37℃孵育 60min。
洗滌微孔:棄液洗滌浸泡 30s,洗板 5 次,吸水紙拍干微孔。
底物顯色:加入顯色 A、B 液避光混勻,37℃顯色 14min。
終止液終止:準時加終止液輕晃酶標板混勻。
酶標儀檢測:450nm 讀取 OD 吸光度數(shù)值。
結(jié)果換算:標準曲線計算稀釋后 Try-Ⅱ 濃度,還原稀釋倍數(shù)出具結(jié)果。
關(guān)鍵字: 人胰蛋白酶原Ⅱ;Try-Ⅱ;ELISA試劑盒;
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