本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理開展檢測，微孔板預(yù)先包被人Ⅱ型膠原蛋白特異性捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本中的HCBⅡ可與固相抗體特異性結(jié)合；充分孵育并洗滌干凈游離成分后，加入酶標(biāo)記的Ⅱ型膠原蛋白檢測抗體，形成夾心免疫復(fù)合物；通過底物酶促顯色反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，吸光度值與樣本中Ⅱ型膠原蛋白含量呈正相關(guān)，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量檢測樣本中靶蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E366 |
英文名稱 | HCBⅡ Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出下限 1.1ng/mL
檢測范圍：2.2~140ng/mL
反應(yīng)時間：一抗孵育 70min，酶二抗 40min，顯色 15min
保存條件：2~8℃避光儲存，凍干標(biāo)準(zhǔn)品 - 20℃長期保存
顯色系統(tǒng)：單組分即用型 TMB 顯色液
檢測波長：450nm 主波長讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：直線線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)品濃度與 OD 值呈正比關(guān)系計算
注意事項：關(guān)節(jié)液樣本需過濾去除絮狀雜質(zhì)；不可劇烈震蕩微孔板；終止液具有腐蝕性謹(jǐn)慎操作
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，取出固相酶標(biāo)板，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本、空白三類孔位，每孔加入預(yù)處理樣品 100μL，空白孔添加稀釋液。
直接加入酶結(jié)合物工作液 50μL，輕晃混勻后封板。
37℃孵育 65min，酶標(biāo)板平放于孵育箱內(nèi)。
揭膜倒掉廢液，每孔加滿洗滌液靜置 30s，甩干，洗板 5 輪后吸干殘液。
每孔依次加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 16min。
每孔加入終止液 50μL 混勻終止顯色。
酶標(biāo)儀 450nm 讀值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 Ⅱ 型膠原蛋白含量。
關(guān)鍵字： 人膠原蛋白Ⅱ;HCBⅡ;ELISA試劑盒;
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