本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)原理，微孔板預(yù)先包被人IAPP特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)血清、胰腺樣本，樣本中的IAPP抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜蛋白，加入酶標(biāo)記IAPP檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物，充分洗滌后進(jìn)行底物顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系定量檢測(cè)樣本中IAPP的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2903 |
英文名稱 | IAPP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出下限 0.05ng/L
檢測(cè)范圍：0.156~10ng/L
反應(yīng)時(shí)間：37℃溫育 85min，二抗 55min，顯色 18min，總 158min
保存條件：試劑盒 2~8℃，多肽標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后僅可凍融 1 次
顯色系統(tǒng)：?jiǎn)我?/span> TMB 顯色終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 單波長(zhǎng)讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：五點(diǎn)位標(biāo)準(zhǔn)品，二次多項(xiàng)式擬合曲線
注意事項(xiàng)：樣本避免胰蛋白酶污染，會(huì)水解 IAPP 抗原肽段
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
血漿樣本稀釋處理：空腹抗凝血漿稀釋配比混勻，室溫靜置 9min；試劑盒整套試劑室溫復(fù)溫 30min。
加樣封板免疫孵育：微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)血漿與酶標(biāo)記液，密封酶標(biāo)板 37℃孵育 65min。
循環(huán)洗板：洗滌液浸泡微孔 35s，洗板 5 次，倒扣酶標(biāo)板拍干殘留洗液。
避光顯色：添加顯色雙液混勻，37℃避光顯色 15min。
終止顯色：滴加終止液終止反應(yīng)并搖勻。
光度測(cè)定：450nm 波長(zhǎng)檢測(cè)各孔 OD 值逐條記錄。
定量分析：擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本 IAPP 原始濃度。
關(guān)鍵字： 人胰島淀粉樣多肽;IAPP;ELISA試劑盒;
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