本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理,微孔板預(yù)先包被人APT特異性捕獲抗體,加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)血漿樣本,樣本中的異常凝血酶原抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合組分,加入酶標(biāo)記APT檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物,充分洗滌后顯色、終止反應(yīng),檢測(cè)吸光度并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),精準(zhǔn)定量樣本中APT的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2828 |
英文名稱(chēng) | APT ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出下限 0.12mAU/mL
檢測(cè)范圍:0.5~32mAU/mL
反應(yīng)時(shí)間:樣本孵育 70min,酶標(biāo)二抗 55min,顯色 18min,合計(jì) 143min
保存條件:2~8℃儲(chǔ)存,稀釋洗滌液可室溫存放 3 天
顯色系統(tǒng):穩(wěn)定 TMB 單組份顯色底物
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm 檢測(cè),630nm 參比校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:八點(diǎn)倍比稀釋?zhuān)膮?shù) Logistic 繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)
注意事項(xiàng):維生素 K 缺乏樣本會(huì)生理性升高,不可直接判定腫瘤指征
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
本試劑盒僅科研體外檢測(cè),嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見(jiàn)光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
空腹血清樣本稀釋?zhuān)簾o(wú)溶血血清稀釋混勻,室溫靜置 10min;整套試劑盒室溫平衡 30min。
共加樣封板孵育:各孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)血清與酶標(biāo)記試劑,密封酶標(biāo)板 37℃孵育 66min。
多次洗板:洗滌液浸泡微孔 40s,洗板 5 次,吸水紙倒扣拍干微孔殘留洗液。
避光顯色:添加顯色雙液震蕩混勻,37℃避光顯色 16min。
終止顯色反應(yīng):滴加終止液終止酶促顯色體系。
儀器檢測(cè)讀數(shù):450nm 檢測(cè)每孔 OD 吸光度并逐條登記。
腫瘤標(biāo)志物定量:標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算稀釋倍率,出具 APT 檢測(cè)數(shù)值。
關(guān)鍵字: 人異常凝血酶原;APT;ELISA試劑盒;
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