本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，將小鼠Slit2蛋白特異性抗體包被于酶標(biāo)板微孔中作為固相捕獲抗體。檢測(cè)過(guò)程中，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠Slit2抗原與固相抗體特異性結(jié)合，經(jīng)洗滌去除非特異性結(jié)合物質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的Slit2檢測(cè)抗體，形成完整的免疫夾心結(jié)構(gòu)。洗滌純化反應(yīng)體系后，加入TMB底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，在酶的催化下底物顯色，顯色深淺與Slit2蛋白含量正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成樣本中小鼠Slit2的定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠Slit2 ELISA試劑盒
英文名稱：Slit2 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2099
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低可檢出 0.07ng/mL
檢測(cè)范圍：0.15ng/mL～28ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃樣本孵育 65min，二抗孵育 38min，底物顯色 17min，終止讀板，合計(jì) 120min
保存條件：整套試劑盒 2～8℃；標(biāo)準(zhǔn)品分裝 - 20℃凍存，反復(fù)凍融不超過(guò) 3 次
顯色系統(tǒng)：HRP 介導(dǎo) TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/630nm 雙波長(zhǎng)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 個(gè)梯度濃度，四參數(shù) Logistic 回歸擬合曲線
注意事項(xiàng)：組織勻漿樣本需去除油脂雜質(zhì)；加樣時(shí)避免產(chǎn)生氣泡，氣泡會(huì)影響 OD 讀數(shù)準(zhǔn)確性。
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫平衡 35min，稀釋濃縮洗滌液，用樣本稀釋液配制 Slit2 標(biāo)準(zhǔn)梯度。
酶標(biāo)板分孔加樣：標(biāo)準(zhǔn)品、小鼠血清樣本、陰性對(duì)照，避免孔間液體交叉。
直接加入酶標(biāo)記抗體液，封板避光 37℃孵育 75min。
棄液洗板 4 次，每次浸泡 30s，拍干微孔板。
加入 TMB 顯色液，遮光顯色 19min。
加入終止液終止反應(yīng)，震蕩混勻。
檢測(cè) OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 Slit2 濃度。
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關(guān)鍵字： 小鼠;Slit2 ;ELISA試劑盒;
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