本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔固相包被有小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ（MIP-1δ/CCL15）特異性抗體。檢測(cè)過程中，樣本及標(biāo)準(zhǔn)品中的CCL15抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合組分后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成特異性免疫復(fù)合物。經(jīng)洗滌純化反應(yīng)體系后，加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色，顯色深淺與樣本中CCL15含量呈正相關(guān)，終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量樣本中炎性蛋白的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒
英文名稱：MIP-1δ ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2073
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出限 0.04pg/mL
檢測(cè)范圍：0.08pg/mL～1000pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃樣本孵育 105min，酶結(jié)合物 68min，顯色 28min，終止 5min 內(nèi)檢測(cè)，總時(shí)長(zhǎng) 201min
保存條件：試劑盒 2～8℃；標(biāo)準(zhǔn)品 - 20℃分裝凍存，工作稀釋液現(xiàn)配現(xiàn)用
顯色系統(tǒng)：改良高靈敏度 TMB 顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：七點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)品，非線性回歸擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：細(xì)胞上清樣本避免細(xì)菌污染；設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照監(jiān)控試劑盒有效性。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫回溫 29min，稀釋洗滌液，配制 CCL15 系列標(biāo)準(zhǔn)品。
酶標(biāo)板依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、小鼠細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本、陰陽(yáng)對(duì)照。
一步添加酶標(biāo)記抗體，封板 37℃孵育 64min。
洗板 6 次，每次浸泡 31s，拍干微孔殘留液體。
TMB 底物避光顯色 16min。
終止液終止顯色，混勻反應(yīng)體系。
檢測(cè)吸光度，繪制曲線計(jì)算 MIP-1δ 含量。
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關(guān)鍵字： 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ;MIP-1δ/CCL15;ELISA試劑盒;
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