本試劑盒可同時(shí)特異性檢測(cè)山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒與梅迪維斯納病病毒兩種反芻動(dòng)物常見致病病毒,通過雙重PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)一次樣本檢測(cè)、兩種病毒同步甄別。試劑盒特異性優(yōu)異,無交叉干擾,檢測(cè)速度快、靈敏度高,能夠精準(zhǔn)檢出潛伏感染及發(fā)病感染樣本中的病毒核酸,主要用于山羊、綿羊養(yǎng)殖群體的疫病篩查、感染確診、引種檢疫及疫病流行監(jiān)測(cè),助力反芻動(dòng)物慢性病毒性疫病的防控。
產(chǎn)品名稱 | 同山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014395 |
英文名稱 | MaediVisna Virus(MVV,)PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理:

提取病畜外周血白細(xì)胞總 RNA,逆轉(zhuǎn)錄生成 cDNA,雙組特異性引物分別靶向兩種病毒基因組保守區(qū)同步擴(kuò)增。
雙熒光標(biāo)記不同發(fā)光基團(tuán)探針,兩種病毒擴(kuò)增產(chǎn)物分別激發(fā)不同波長(zhǎng)熒光,實(shí)現(xiàn)單一管雙重病原鑒別。
設(shè)置病毒 RNA 內(nèi)參基因同步擴(kuò)增,監(jiān)控樣本 RNA 降解、逆轉(zhuǎn)錄酶失活等實(shí)驗(yàn)失敗因素。
?操作步驟?:

1. 樣本處理
提取待測(cè)樣本RNA,建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對(duì)照稀釋(示例:6個(gè)梯度)
標(biāo)記離心管(7至2號(hào)),每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對(duì)照,避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制(20μL/反應(yīng))
| 組分 | 體積(μL) |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄:50℃ 15分鐘(可選,根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整)。
預(yù)變性:95℃ 2分鐘。
循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號(hào)),共40循環(huán)。
?注意事項(xiàng)?:

避免反復(fù)凍融試劑,解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)),防止污染。
陽性對(duì)照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途,不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備,避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則,運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
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關(guān)鍵字: 同山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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