該試劑盒專門用于葡萄糖苷曼氏桿菌的核酸分子檢測，靶向該菌株特有基因片段構(gòu)建PCR擴增體系，可精準(zhǔn)識別樣本中的目標(biāo)病原菌。產(chǎn)品操作便捷、檢測周期短、結(jié)果穩(wěn)定性高，可有效區(qū)分葡萄糖苷曼氏桿菌與其他曼氏桿菌及常見呼吸道致病菌，適用于畜禽呼吸道、組織樣本中該菌的感染篩查、病例確診及養(yǎng)殖環(huán)境病原污染檢測。
產(chǎn)品名稱 | 葡萄糖苷曼氏桿菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014398 |
英文名稱 | Mannheimia glucosidaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
分離呼吸道樣本菌體，提取 DNA，引物識別葡萄糖苷曼氏桿菌葡萄糖苷酶編碼特異性基因擴增。
擴增產(chǎn)物經(jīng)特異性限制性內(nèi)切酶酶切，酶切片段條帶特征區(qū)分該菌與其他曼氏桿菌。
陰性對照采用無菌緩沖液同步操作，驗證試劑、耗材無曼氏桿菌核酸污染。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴增。
?注意事項?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 葡萄糖苷曼氏桿菌;PCR檢測試劑盒;
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