本試劑盒靶向小孢子菌屬菌株的共有保守基因序列設(shè)計擴(kuò)增體系，可廣譜檢測犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、納米小孢子菌等所有小孢子菌屬致病菌株。產(chǎn)品通用性強、覆蓋菌株全面，特異性無其他真菌交叉干擾，檢測高效便捷，適用于臨床皮膚真菌感染初步篩查、規(guī)?；瘜櫸镳B(yǎng)殖真菌病普查、環(huán)境微生物菌群檢測。
產(chǎn)品名稱 | 小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014419 |
英文名稱 | Microsporum spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
毛發(fā)、皮屑樣本提取全部真菌 DNA，引物靶向小孢子菌屬共有 18S rRNA 保守基因擴(kuò)增。
只要樣本存在任意一種小孢子菌，即可擴(kuò)增出目標(biāo)核酸條帶，實現(xiàn)屬篩查。
搭配真菌提取內(nèi)參，確認(rèn)樣本真菌核酸提取成功，避免假陰性。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋（示例：6個梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補至20 |
4. 上機程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號），共40循環(huán)。
?注意事項?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實驗環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽性對照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則，運輸時使用干冰或冰袋保存。
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