本試劑盒采用特異性PCR擴(kuò)增原理，針對(duì)豬腸病毒特征基因序列設(shè)計(jì)專屬引物探針，可快速、精準(zhǔn)檢測(cè)各類豬臨床樣本中的豬腸病毒核酸。產(chǎn)品優(yōu)化了核酸擴(kuò)增反應(yīng)體系，大幅提升低病毒載量樣本的檢出率，有效降低漏檢概率，且與豬其他常見腸道、呼吸道病原無(wú)交叉反應(yīng)。適用于豬腸病毒引發(fā)的腹瀉、腸道炎癥等病癥的臨床診斷、隱性感染豬群篩查、豬場(chǎng)疫病流行調(diào)研，廣泛應(yīng)用于畜牧疫病檢測(cè)、病原流行病學(xué)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 | 豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014612 |
英文名稱 | Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
先對(duì)病料研磨裂解，釋放病毒 RNA，逆轉(zhuǎn)錄生成互補(bǔ) DNA，為 PCR 擴(kuò)增提供模板基礎(chǔ)。
探針特異性結(jié)合豬腸病毒 5' 非編碼區(qū)保守片段，即使毒株出現(xiàn)輕微變異也可穩(wěn)定識(shí)別。
通過(guò)循環(huán)擴(kuò)增后對(duì)比 Ct 值大小，Ct 低于臨界值代表樣本含有豬腸病毒核酸，實(shí)現(xiàn)定性檢測(cè)。
?操作步驟?：
RNA提?。菏褂门涮自噭┗蛏虡I(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制：按說(shuō)明書比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)），于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析：通過(guò)Ct值判定病毒含量，陽(yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
?注意事項(xiàng)?：
試劑盒含生物源性質(zhì)粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，陽(yáng)性模板僅在生物安全柜開蓋；
所有一次性耗材、PCR 廢液、電泳凝膠實(shí)驗(yàn)后 121℃高壓滅菌再丟棄；
試劑避免反復(fù)凍融，單次融化冰上放置不超過(guò) 2 h，使用完畢立即放回 - 20℃；
移液器吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取，防止交叉污染；
試劑盒僅用于科研檢測(cè)，嚴(yán)禁人臨床體外診斷；
擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)產(chǎn)物不可帶回試劑、提取區(qū)，防止氣溶膠大面積污染實(shí)驗(yàn)室；
若陰性對(duì)照持續(xù)出現(xiàn)雜帶，全部更換全新試劑盒，實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、移液器紫外過(guò)夜消毒。
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關(guān)鍵字： 豬腸病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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