?產品名稱：犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱：Neospora caninumPCR
貨號：YS-P014508
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
裂解犬組織、血液等樣本中新孢子蟲蟲體，提取并純化蟲體 DNA，去除宿主基因組 DNA 帶來的背景干擾。
引物靶向犬新孢子蟲特異性重復序列，具備極強物種特異性，避免與弓形蟲等其他原蟲發(fā)生交叉擴增。
經 PCR 擴增富集特異性核酸片段，根據(jù)擴增產物有無，判定樣本是否存在犬新孢子蟲感染。
實驗流程：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應體系配制（20 μL體系示例）：
預混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補充無核酸酶水至終體積。
PCR擴增程序：
預變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗證擴增特異性）。
結果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復測或結合熔解曲線分析。
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注意事項：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復吸?。?/span>
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴增產物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關鍵字： 犬新孢子蟲;PCR檢測試劑盒;
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