本試劑盒針對(duì)扇革蜱屬昆蟲通用保守基因序列研發(fā)PCR檢測(cè)體系，可廣譜檢測(cè)各類扇革蜱樣本核酸，實(shí)現(xiàn)扇革蜱蟲體的快速鑒定與篩查。扇革蜱是多種人畜共患病原的傳播媒介，本試劑盒特異性強(qiáng)、無(wú)交叉干擾，可快速區(qū)分扇革蜱與其他蜱類品種，適用于媒介生物監(jiān)測(cè)、疫病傳播風(fēng)險(xiǎn)排查、野外蜱類種群普查及公共衛(wèi)生防控工作。
產(chǎn)品名稱 | 扇革蜱通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014676 |
英文名稱 | Rhipicentor spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物選取扇革蜱屬共有的保守線粒體基因序列，可擴(kuò)增屬內(nèi)各類扇革蜱 DNA。
提取蜱蟲樣本基因組 DNA，經(jīng) PCR 熱循環(huán)富集目標(biāo)基因片段。
擴(kuò)增陽(yáng)性可判定樣本蜱蟲屬于扇革蜱屬，適用于蜱類屬級(jí)分子篩查。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨(dú)立操作區(qū)）
標(biāo)記6管為梯度稀釋點(diǎn)（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽(yáng)性對(duì)照依次稀釋，混勻后作為標(biāo)準(zhǔn)品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機(jī)檢測(cè)
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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