?產(chǎn)品名稱(chēng):仙臺(tái)病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Sendai Virus(SV)RTPCR
貨號(hào):YS-P014739
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測(cè)原理:
依據(jù)仙臺(tái)病毒核蛋白基因保守序列設(shè)計(jì)引物,可特異性識(shí)別該呼吸道病毒核酸。
經(jīng) RNA 逆轉(zhuǎn)錄獲得 cDNA 后,通過(guò)溫度循環(huán)擴(kuò)增病毒特異性片段。
檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物判定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物樣本是否攜帶仙臺(tái)病毒。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū))
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA,建議濃度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備(獨(dú)立操作區(qū))
標(biāo)記6管為梯度稀釋點(diǎn)(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽(yáng)性對(duì)照依次稀釋?zhuān)靹蚝笞鳛闃?biāo)準(zhǔn)品(避免污染)。
3. PCR反應(yīng)體系配制(試劑配制區(qū))
按以下比例配制(示例):
| 組分 | 體積(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機(jī)檢測(cè)
程序設(shè)置:預(yù)變性95℃ 3 min;40循環(huán)(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析:根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
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注意事項(xiàng):
所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過(guò) 2 h,酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)??截悢?shù)極高,開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶,槍頭一次性使用;實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè),嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字: 仙臺(tái)病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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