本試劑盒依托PCR分子擴(kuò)增技術(shù)，靶向擴(kuò)增節(jié)瘤擬桿菌特異性基因片段，可對畜禽養(yǎng)殖環(huán)境、動物樣本中的節(jié)瘤擬桿菌進(jìn)行定性檢測。產(chǎn)品體系穩(wěn)定、抗干擾能力強(qiáng)，可快速完成病原篩查，解決傳統(tǒng)微生物檢測周期長的問題，適用于畜牧養(yǎng)殖疫病監(jiān)測、畜禽口腔及消化道感染病原診斷、養(yǎng)殖環(huán)境微生物防控。
產(chǎn)品名稱 | 節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P015073 |
英文名稱 | Dichelobacter nodosus PCR Detection Kit | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物針對節(jié)瘤擬桿菌 nuoN 基因特有片段設(shè)計，特異性識別該牛羊腐蹄病致病菌。
從動物蹄部病灶組織提取細(xì)菌 DNA，經(jīng) PCR 熱循環(huán)擴(kuò)增富集目標(biāo)病原菌核酸。
通過陽性菌株擴(kuò)增條帶比對結(jié)果，快速完成節(jié)瘤擬桿菌感染的分子診斷。
?操作步驟?：
DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容的核酸提取試劑盒純化樣本DNA，確保無抑制劑殘留。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（樣本制備區(qū)）
標(biāo)記6支離心管為7至2號，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用帶濾芯槍頭）。
梯度稀釋陽性對照：
7號管：加入5 μL 1×10^8拷貝/μL陽性對照，震蕩混勻，得1×10^7拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品；
依次稀釋至2號管，最終濃度跨5個數(shù)量級（1×10^7至1×10^3拷貝/μL）。
所有標(biāo)準(zhǔn)品置于冰上備用，避免反復(fù)凍融。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)液避光解凍后渦旋混勻，短暫離心分裝至PCR管。
每反應(yīng)體系20 μL，含預(yù)混引物、熒光染料及緩沖液。
加樣（樣本處理區(qū)）
分別加入5 μL待測DNA或標(biāo)準(zhǔn)品至反應(yīng)管，陰性對照以DEPC-H2O替代。
蓋緊管蓋，避免氣泡干擾。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
按以下程序運(yùn)行定量PCR儀：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析（可選）。
?注意事項?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： 節(jié)瘤擬桿菌;PCR檢測試劑盒;
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