細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體
原理特點
檢測NF-κB p65總蛋白水平。NF-κB的持續(xù)激活與慢性炎癥、自身免疫病和多種腫瘤密切相關(guān)。該抗體廣泛用于評估炎癥通路激活、藥物抗炎效果和腫瘤NF-κB依賴性存活機制。
英文名稱:NFKB p65 Rabbit pAb
中文名稱:細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體
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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:TF65_HUMAN; Transcription factor p65; RELA; Nuclear factor NF-kappa-B p65 subunit; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 3; NFKB3; RELA proto-oncogene, NF-kB subunit; p65; CMCU; NFKB3; AIF3BL3; NF-kB p65/RelA; NFκB-p65; NFκB p65; NF κB-p65; NFκBp65;
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human NFKBp65
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：61 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
識別 NF-κB 家族保守結(jié)構(gòu)域，覆蓋 p65、p50、p52、c-Rel、RelA 全部亞基總蛋白水平。
統(tǒng)一檢測細胞內(nèi)全部 NF-κB 儲備總量，對比刺激前后總蛋白變化，搭配 p65 活化型抗體區(qū)分總量與激活量。
適用于初篩通路是否整體上調(diào)，快速判斷模型是否存在 NF-κB 通路整體擾動。
樣本處理標準流程
1. 細胞樣本制備
洗滌：用預冷PBS輕貼細胞表面洗滌2-3次，避免用力沖洗導致細胞脫落。
固定與通透：4℃預冷的4%多聚甲醛固定15-20分鐘；如需檢測胞內(nèi)蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室溫通透10-15分鐘。
封閉：用5% BSA或10%胎牛血清室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合。
2. 組織樣本制備
石蠟切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分鐘）脫蠟水化；檸檬酸緩沖液（pH6.0）熱修復10-15分鐘，自然冷卻至室溫。
新鮮組織：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小時，或-80℃冷凍保存；冷凍切片厚度控制在5-10μm，貼片后自然干燥30分鐘。
3. WB蛋白樣本制備
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑）冰上裂解細胞30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白濃度，調(diào)整至上樣量一致；加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘變性，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
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關(guān)鍵字： 細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體;Rabbit;61 kDa;
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