細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
原理特點
靶向NF-κB p50亞基，由p105前體經(jīng)蛋白酶體加工產(chǎn)生。p50同二聚體缺乏轉(zhuǎn)錄激活域，作為轉(zhuǎn)錄抑制因子；p50/p65異二聚體則激活轉(zhuǎn)錄。該抗體用于區(qū)分NF-κB不同二聚體組成和功能。
英文名稱:NFKB1 Rabbit pAb
中文名稱:細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:NFKB1_HUMAN; Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit; DNA-binding factor KBF1; EBP-1; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 1; Nuclear factor NF-kappa-B p50 subunit; NFkB p105/p50; NFkB p105/p50; nuclear factor kappa B subunit 1; NF-kB; CVID12; NF-kB1; NFKB-p50; NFkappaB; NF-kappaB; NFKB-p105; NF-kappa-B1; NF-kappabeta;
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Nuclear factor NF-kappa-B p50 subunit
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：48/105 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
p50 由 p105 前體蛋白剪切生成，是 NF-κB 經(jīng)典異二聚體 p50-p65 必需亞基，負(fù)責(zé) DNAκB 序列結(jié)合。
無單獨轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，需結(jié)合 RelA/p65 才能啟動轉(zhuǎn)錄；同源二聚體 p50/p50 常發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制作用。
調(diào)控免疫發(fā)育、淋巴器官形成；p50 缺失小鼠免疫缺陷、抗感染能力大幅下降，抗體單獨定量 p50 亞基豐度。
實驗優(yōu)化與注意事項
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻?，選擇信噪比最高的組合
預(yù)實驗：首次使用建議進(jìn)行濃度梯度預(yù)實驗，確定最佳工作濃度
樣本處理要點
細(xì)胞樣本：貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮收集，懸浮細(xì)胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復(fù)凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對照應(yīng)無條帶或明顯弱于陽性對照
IHC：陽性信號應(yīng)定位于目標(biāo)蛋白的正常亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞核、細(xì)胞膜）
IF：觀察熒光信號是否與目標(biāo)蛋白亞細(xì)胞定位一致，DAPI染色定位細(xì)胞核
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關(guān)鍵字： 細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體;Rabbit;48/105 kDa;
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