人羧肽酶A5(CPA5)重組蛋白開展多肽末端氨基酸水解、神經(jīng)肽加工、組織發(fā)育調(diào)控體外底物篩選與酶活定量實驗。
型號:YS-DB2634
產(chǎn)品名稱:人羧肽酶A5(CPA5)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測分子量:-
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
檢測原理:

多肽 C 端氨基酸切除酶活測定:以特異性合成多肽為底物,CPA5 水解釋放游離氨基酸,色譜 / 顯色法定量水解產(chǎn)物,計算酶活性。
亞型特異性免疫定量原理:CPA5 專屬抗體特異性結(jié)合重組蛋白,夾心 ELISA 體系比色,換算蛋白濃度。
Western Blot 結(jié)構(gòu)完整性檢測:電泳轉(zhuǎn)膜抗體雜交,匹配理論分子量,判定重組蛋白是否全長正確表達。
鋅離子依賴活性佐證:鋅離子為 CPA5 催化必需輔因子,去金屬螯合處理后酶活喪失,排除其他蛋白酶干擾檢測。
公司正在出售的產(chǎn)品:

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復(fù)溶操作要點:

復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒:移液槍頭、離心管需經(jīng)過高壓滅菌或一次性無菌處理,避免引入污染。
緩沖液選擇:優(yōu)先使用產(chǎn)品說明書推薦的專用復(fù)溶緩沖液,若無推薦可使用:
基礎(chǔ)型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保護型:在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢劑(如0.05% Triton X-100),酶類需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心:將凍干蛋白管置于離心機,4℃下8000rpm離心30秒,使底部蛋白集中。
緩慢加液:沿管壁緩慢加入適量緩沖液,避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解:輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸,禁止渦旋振蕩(易導(dǎo)致蛋白變性)。
靜置溶解:4℃靜置10-30分鐘,難溶蛋白可延長至1小時,期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字: 人羧肽酶A5;CPA5;重組蛋白;
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