本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，預(yù)先將純化的大鼠IL-2特異性抗體包被于微孔板孔內(nèi)，形成固相抗體，向孔內(nèi)加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)大鼠樣本后，樣本中的IL-2抗原與固相抗體特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗大鼠IL-2抗體，形成“固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”的夾心免疫復(fù)合物，充分孵育洗滌后去除未結(jié)合的游離成分，加入底物顯色液進(jìn)行顯色反應(yīng)，在酶的催化下底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物，最后加入終止液終止反應(yīng)，通過酶標(biāo)儀測(cè)定對(duì)應(yīng)波長下的吸光度值，吸光度值與樣本中大鼠IL-2的含量呈正相關(guān)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)計(jì)算出樣本中IL-2的含量
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒

英文名稱：IL-2 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1651

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤1.0pg/mL

檢測(cè)范圍：2pg/mL - 800pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：整體反應(yīng)時(shí)長約3.5小時(shí)（包被結(jié)合60min、孵育90min、顯色15min）

保存條件：2-8℃低溫避光保存，嚴(yán)禁冷凍

有效期：未開封原裝試劑盒有效期6個(gè)月

顯色系統(tǒng)：TMB雙組分顯色液，辣根過氧化物酶催化顯色

檢測(cè)波長：450nm（主波長）、630nm（參比波長）

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)，采用四參數(shù)Logistic擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

特異性：特異性識(shí)別大鼠IL-2，與大鼠其他白介素、細(xì)胞因子無明顯交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤8%，板間變異系數(shù)CV≤10%

注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)所有耗材需無熱源、無內(nèi)毒素；標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋后不可留存；顯色過程嚴(yán)格避光，終止后15分鐘內(nèi)完成上機(jī)檢測(cè)
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

樣本、試劑盒室溫平衡 30min，配制 IL-2 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋液，預(yù)留空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣本孔并標(biāo)記；

每孔同步加入 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測(cè)大鼠血清 / 組織上清樣本，空白孔加等量樣本稀釋液；

所有孔立即加入 100μL 辣根過氧化物酶標(biāo)記 IL-2 一抗工作液，封板膜密封酶標(biāo)板；

37℃恒溫孵育 60min，使抗原抗體一步特異性結(jié)合；

撕去封板膜，棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌緩沖液，靜置 30s 后拍干，重復(fù)洗板 5 次；

每孔先后加入顯色底物 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 15min；

每孔加 50μL 終止液終止顯色，15min 內(nèi)酶標(biāo)儀 450nm 波長讀取各孔 OD 值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 IL-2 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：