本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,微孔板內(nèi)壁包被純化的大鼠IL-2R特異性捕獲抗體,實驗過程中,樣本與標準品中的IL-2R抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌后加入酶標記的抗IL-2R檢測抗體,構(gòu)建夾心免疫復(fù)合物,通過底物催化顯色反應(yīng)呈現(xiàn)特異性顏色,顏色深淺對應(yīng)樣本中IL-2R的含量高低,終止反應(yīng)后通過酶標儀檢測吸光度,對照標準曲線完成樣本中IL-2R濃度的定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
英文名稱:IL-2R ELISA Kit
貨號:Y-E1108
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測濃度≤1.1pg/mL
檢測范圍:3pg/mL - 900pg/mL
反應(yīng)時間:總時長3.3小時,分步精準孵育
保存條件:2-8℃低溫保存,洗滌濃縮液可室溫存放
有效期:未開封6個月,工作液現(xiàn)配現(xiàn)用
顯色系統(tǒng):HRP標記抗體介導TMB底物顯色
檢測波長:450nm/620nm雙波長校正
標準曲線繪制:8梯度標準品,四參數(shù)擬合,自動修正偏差
特異性:特異性結(jié)合大鼠IL-2完整受體,無其他受體交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%
注意事項:樣本采集后及時檢測,長期保存需-80℃冷凍;避免試劑污染,全程無菌操作
試劑盒組成:

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下:

室溫平衡所有試劑盒組分 30min,稀釋 IL-2R 標準品,區(qū)分標準孔、樣本孔、空白孔;
每孔加入 50μL 對應(yīng)標準品或大鼠細胞上清樣本,空白孔添加等量稀釋液;
加入 100μL 酶標記抗大鼠 IL-2R 抗體,封板膜密封酶標板;
37℃避光孵育 65min,一步孵育形成免疫復(fù)合物;
洗滌緩沖液加滿微孔浸泡 30s,拍干,洗板 5 次;
避光添加顯色底物 A、B 各 50μL,37℃避光顯色 17min;
終止液終止反應(yīng),混勻后 450nm 讀取 OD 值,計算 IL-2R 濃度。
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關(guān)鍵字: 大鼠白介素2受體;IL-2R;ELISA試劑盒;
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