本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)，微孔板固定純化的大鼠IL-4特異性捕獲抗體，加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品及大鼠血清、細(xì)胞上清等待測樣本，樣本中的IL-4抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合，洗板凈化后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體，形成夾心結(jié)構(gòu)免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，測定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸公式，精準(zhǔn)定量大鼠樣本中IL-4的濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒

英文名稱：IL-4 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1650

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測濃度≤0.6pg/mL

檢測范圍：1pg/mL - 600pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長3.5小時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)孵育流程

保存條件：2-8℃低溫保存，洗滌液室溫保存

有效期：原裝6個(gè)月，工作液當(dāng)日配置當(dāng)日使用

顯色系統(tǒng)：HRP-TMB經(jīng)典顯色系統(tǒng)

檢測波長：450nm/630nm雙波長校正

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：8梯度標(biāo)準(zhǔn)品，四參數(shù)回歸擬合，曲線相關(guān)性優(yōu)異

特異性：特異性識(shí)別大鼠IL-4，與Th2型其他細(xì)胞因子無顯著交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6.8%，板間CV≤8.8%

注意事項(xiàng)：血清樣本無需稀釋可直接檢測；孵育過程避免震動(dòng)；洗板徹底，杜絕殘留
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

室溫平衡試劑 28min，稀釋 IL-4 標(biāo)準(zhǔn)品，劃分酶標(biāo)板標(biāo)準(zhǔn)、樣本、空白區(qū)域；

每孔加入 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品 / 大鼠血清，空白孔添加稀釋緩沖液；

全部微孔加入 100μL 酶標(biāo)記抗 IL-4 抗體，封板膜密封；

37℃孵育 60min，一步孵育生成免疫復(fù)合物；

洗板液浸泡微孔 30s，拍干，洗板 5 次；

避光添加顯色底物混合液 100μL，37℃避光顯色 14min；

終止液混勻，450nm 測 OD 值，計(jì)算樣本 IL-4 表達(dá)水平。
公司正在出售的產(chǎn)品：