本試劑盒運用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，將抗大鼠IL-5特異性抗體包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi)，作為固相捕獲體系，樣本中的IL-5抗原可特異性結(jié)合至固相抗體上，洗滌去除游離雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的抗IL-5抗體完成夾心結(jié)合，通過酶促底物顯色反應(yīng)產(chǎn)生特異性顯色信號，信號強(qiáng)度與樣本中IL-5含量成正比，終止反應(yīng)后檢測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
英文名稱：IL-5 ELISA Kit
貨號：Y-E1494
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤0.8pg/mL
檢測范圍：2pg/mL - 750pg/mL
反應(yīng)時間：完整流程3.4小時
保存條件：2-8℃避光密封保存，試劑禁止凍存
有效期：未開封6個月，開封后2個月有效
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定型雙組分TMB顯色體系
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7個濃度梯度，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2≥0.993
特異性：特異性結(jié)合大鼠IL-5，無其他白介素交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.5%，板間CV≤9.5%
注意事項：樣本避免污染、溶血；顯色時間嚴(yán)格控制15-20分鐘；上機(jī)檢測前擦干板底水漬
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
IL-5 凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶配制梯度，試劑盒室溫平衡 30min，標(biāo)記酶標(biāo)板孔；
標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入大鼠細(xì)胞培養(yǎng)液 50μL，空白孔補(bǔ)稀釋液；
加入 100μL HRP 標(biāo)記抗 IL-5 抗體，覆膜封閉酶標(biāo)板；
37℃避光孵育 62min，一步完成抗原標(biāo)記抗體結(jié)合；
洗滌緩沖液浸泡 40s，吸干，連續(xù)洗板 5 次；
避光加顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反應(yīng) 15min；
終止液終止反應(yīng)，450nm 檢測吸光度，換算 IL-5 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠白介素5;IL-5;ELISA試劑盒;
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