本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,微孔板預(yù)先包被大鼠LTE4固相抗原,反應(yīng)體系中待測樣本中的游離LTE4抗原與固相抗原競爭性結(jié)合酶標記特異性抗體,二者形成競爭抑制關(guān)系,樣本中LTE4含量越高,固相免疫復合物的酶活性越低,底物顯色越淺,終止反應(yīng)后檢測各孔吸光度,依據(jù)標準曲線的負相關(guān)對應(yīng)關(guān)系,精準定量大鼠樣本中LTE4的濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒
英文名稱:LT-E4 ELISA Kit
貨號:Y-E1102
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測濃度≤2.0pg/mL
檢測范圍:7pg/mL - 2000pg/mL
反應(yīng)時間:總時長4.5小時,充分結(jié)合反應(yīng)
保存條件:2-8℃避光低溫保存,禁止冷凍
有效期:原裝試劑盒6個月
顯色系統(tǒng):適配LTE4檢測的專用顯色體系,背景低、靈敏度高
檢測波長:450nm/630nm雙波長校正
標準曲線繪制:8梯度濃度,四參數(shù)擬合,R2≥0.992
特異性:特異性識別大鼠LTE4,不與LTB4、LTC4及炎癥脂質(zhì)因子交叉反應(yīng)
重復性:板內(nèi)CV≤8.5%,板間CV≤10.5%
注意事項:全程避光、低溫操作;渾濁樣本必須離心澄清;嚴格控制孵育溫度和時長
儲存與有效期:

未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復溶后標準品:分裝 - 20℃凍存,避免反復凍融,1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下:

LTE4 凍干標準品復溶稀釋,試劑盒室溫平衡 30min,劃分酶標板孔類型;
各微孔加入 50μL 標準品或大鼠體液樣本,空白孔添加等量稀釋緩沖液;
加入 100μL 辣根酶標記抗 LTE4 抗體,密封酶標板防止蒸發(fā);
37℃避光孵育 61min,一步完成抗原標記抗體結(jié)合;
洗板液浸泡微孔 35s,拍干,連續(xù)洗板 5 次;
避光添加顯色底物混合液 100μL,37℃避光顯色 16min;
終止液混勻,450nm 檢測 OD 值,計算 LTE4 表達量。
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