雙抗體夾心 ELISA 原理,板底預(yù)包被 CⅠCP 特異性捕獲抗體,樣本中 Ⅰ 型前膠原 C 端肽結(jié)合固相抗體,酶標二抗與靶蛋白結(jié)合形成夾心復(fù)合物,洗板顯色后通過標準曲線定量膠原合成標志物 CⅠCP。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1319 |
英文名稱 | CⅠCP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測限0.22ng/mL,適配膠原合成標志物檢測
檢測范圍:0.45ng/mL - 45ng/mL
反應(yīng)時間:總時長95分鐘,樣本孵育65分鐘,二抗孵育30分鐘
保存條件:2-8℃避光保存,抗體組分禁止冷凍
有效期:未開封原裝6個月有效
顯色系統(tǒng):TMB雙組分顯色體系,顯色穩(wěn)定均勻
檢測波長:450nm主波長檢測
標準曲線繪制:6梯度標準品,四參數(shù)擬合,R2≥0.996
特異性:特異性識別CⅠCP,與其他前膠原末端肽無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤4.9%,板間CV≤6.9%
注意事項:樣本避免溶血、脂血干擾;試劑平衡室溫后混勻使用;終止后15分鐘內(nèi)完成讀數(shù)
試劑盒組成:
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑平衡:試劑室溫靜置 24min,洗滌液稀釋 20 倍,纖維化組織勻漿上清備用。
標準品稀釋:CⅠCP 標準品稀釋配制 6 梯度溶液,設(shè)置空白調(diào)零孔。
加樣孵育:50μL 標準品 / 樣本 + 50μL 酶標抗體,封膜 37℃避光孵育 60min。
洗板操作:洗滌液浸泡 30s,拍干殘液,洗板 5 次。
底物顯色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 15min。
終止讀數(shù):終止液混勻,10min 內(nèi)讀取吸光度。
數(shù)據(jù)計算:定量 CⅠCP,評價膠原合成纖維化程度。
關(guān)鍵字: 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽;CⅠCP;ELISA試劑盒;
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