雙抗體夾心免疫酶聯(lián)吸附，酶標(biāo)板包被抗大鼠 PⅠNP 捕獲抗體，樣本膠原合成標(biāo)志物 PⅠNP 固定于板底，加入酶標(biāo)記檢測抗體，洗滌顯色后測定吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量樣本 PⅠNP 含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1034 |
英文名稱 | NP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度0.2ng/mL，精準(zhǔn)反映膠原合成水平
檢測范圍：0.4ng/mL - 40ng/mL
反應(yīng)時間：總時長90分鐘，樣本孵育60分鐘，二抗孵育30分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，標(biāo)準(zhǔn)品開封后分裝-20℃保存
有效期：原裝試劑盒6個月，分裝樣本3個月有效
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色系統(tǒng)，低背景高精準(zhǔn)度
檢測波長：450nm、630nm雙波長校正檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6濃度梯度，四參數(shù)擬合，R2≥0.997
特異性：專一靶向PⅠNP，與各類膠原降解肽段無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4.6%，板間CV≤6.6%
注意事項：樣本低溫保存，防止前肽降解；加樣精準(zhǔn)，避免孔間誤差；洗滌充分，去除非特異性結(jié)合
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫平衡 30min，20× 洗滌液稀釋，血清樣本無脂血溶血。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：PⅠNP 凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶梯度稀釋 6 組，空白對照孔。
加樣孵育：每孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本，酶結(jié)合物 50μL，37℃避光密封孵育 66min。
洗板操作：洗滌液浸泡 36s，徹底拍干，洗板 6 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 18min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)。
數(shù)據(jù)計算：標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 PⅠNP，反映骨膠原合成速率。
關(guān)鍵字： 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽;PⅠNP;ELISA試劑盒;
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