雙抗體夾心 ELISA 原理，酶標(biāo)板預(yù)包被 PⅢNP 特異性捕獲抗體，樣本中 Ⅲ 型前膠原肽結(jié)合固相抗體，HRP 標(biāo)記檢測抗體結(jié)合靶蛋白，洗板顯色后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量血清、組織 PⅢNP 水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1413 |
英文名稱 | PⅢNP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測限0.22ng/mL，纖維化標(biāo)志物專屬檢測
檢測范圍：0.45ng/mL - 45ng/mL
反應(yīng)時間：總時長95分鐘，樣本孵育65分鐘，二抗孵育30分鐘
保存條件：2-8℃避光保存，試劑密封防污染
有效期：未開封原裝6個月有效
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定TMB雙組分顯色體系
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6梯度標(biāo)準(zhǔn)品，四參數(shù)擬合，R2≥0.996
特異性：專一靶向PⅢNP，與各類膠原肽段無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4.8%，板間CV≤6.8%
注意事項(xiàng)：避免樣本溶血、脂血；孵育過程保濕密封，防止液體蒸發(fā)影響濃度
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫平衡 21min，濃縮洗滌液稀釋 20 倍，臟器勻漿上清混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：PⅢNP 凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶梯度稀釋 6 濃度，空白孔對照。
加樣孵育：50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本 + 50μL HRP 酶抗體，封膜 37℃避光孵育 59min。
洗板操作：洗滌液浸泡 30s，拍干殘液，洗板 5 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 14min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，8min 內(nèi)檢測 OD450。
數(shù)據(jù)計算：標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 PⅢNP，反映膠原纖維增生水平。
關(guān)鍵字： 大鼠Ⅲ型前膠原肽;PⅢNP;ELISA試劑盒;
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