雙抗體夾心免疫酶聯(lián)法，板底包被抗 PⅢNT 捕獲抗體，樣本纖維化標(biāo)志物 PⅢNT 結(jié)合固相載體，酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成夾心結(jié)構(gòu)，洗滌顯色后讀取吸光度，定量反映組織膠原合成與纖維化程度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1461 |
英文名稱 | PⅢNT ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.2ng/mL，肝纖維化核心標(biāo)志物精準(zhǔn)檢測(cè)
檢測(cè)范圍：0.4ng/mL - 40ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)100分鐘，樣本孵育70分鐘，二抗孵育30分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，標(biāo)準(zhǔn)品分裝后-20℃保存
有效期：原裝試劑盒6個(gè)月，分裝標(biāo)準(zhǔn)品3個(gè)月
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色體系，適配小分子肽段檢測(cè)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm、630nm雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6濃度梯度，四參數(shù)Logistic擬合，R2≥0.997
特異性：特異性識(shí)別PⅢNT，無(wú)其他膠原前肽交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4.5%，板間CV≤6.5%
注意事項(xiàng)：血清樣本新鮮分離，避免肽段降解；全程無(wú)熱源操作，防止非特異性結(jié)合
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：試劑室溫靜置 30min，洗滌液 1:20 稀釋?zhuān)鍢颖咎崆敖鈨觥?/span>
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)?/span>PⅢNT 標(biāo)準(zhǔn)品溶解梯度稀釋 6 梯度，空白對(duì)照孔。
加樣孵育：每孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本，酶結(jié)合物 50μL，37℃避光孵育 67min。
洗板操作：洗滌液浸泡 37s，充分拍干，洗板 6 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 19min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi)讀取吸光度。
數(shù)據(jù)計(jì)算：曲線計(jì)算 PⅢNT，評(píng)估早期纖維化損傷。
關(guān)鍵字： 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽;PⅢNT;ELISA試劑盒;
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