本試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，酶標(biāo)板包被u-T4特異性抗原，待測(cè)大鼠樣本中的u-T4與包被抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合定量的特異性抗體，后續(xù)結(jié)合酶標(biāo)二抗催化底物顯色，樣本中u-T4含量越高，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的抗體越多，顯色吸光度值越低，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)擬合，可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中高敏甲狀腺素的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.01ng/mL

檢測(cè)范圍：0.05ng/mL - 20ng/mL

反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)120分鐘（樣本溫育60分鐘、酶結(jié)合物溫育30分鐘、顯色30分鐘）

保存條件：全套試劑2-8℃避光冷藏，洗滌液室溫密封保存，禁止冷凍

有效期：未開(kāi)封有效期12個(gè)月，開(kāi)封后試劑組分2-8℃可保存2個(gè)月

顯色系統(tǒng)：TMB/H?O?顯色體系，酸性終止液終止顯色反應(yīng)

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm單一波長(zhǎng)檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：采用六參數(shù)對(duì)數(shù)擬合曲線(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)品梯度濃度對(duì)應(yīng)OD值擬合，R2≥0.995

特異性：高特異性結(jié)合大鼠u-T4，與T3、促甲狀腺激素等甲狀腺相關(guān)因子無(wú)明顯交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%

注意事項(xiàng)：高敏檢測(cè)需保證樣本無(wú)雜質(zhì)、無(wú)反復(fù)凍融；所有耗材需無(wú)酶無(wú)污染；溫育溫度偏差不得超過(guò)±1℃
儲(chǔ)存與有效期：

未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。

開(kāi)封后保存

剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。

HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。

復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。

過(guò)期試劑禁止使用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒試劑室溫回溫 25min，按照說(shuō)明書(shū)倍比稀釋 u-T4 標(biāo)準(zhǔn)品，排布酶標(biāo)板孔位：空白、標(biāo)準(zhǔn)梯度、大鼠血漿待測(cè)孔。

一步法直接加樣：標(biāo)準(zhǔn)品孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)液 100μL，樣本孔加預(yù)處理大鼠待測(cè)樣本 100μL，空白孔加稀釋緩沖液。

覆膜封板，置于 37℃孵箱溫育 70min，保證 u-T4 抗原與包被抗體充分特異性結(jié)合。

手動(dòng)洗板，每孔注滿(mǎn)洗滌液靜置 25s，倒扣拍凈廢液，連續(xù)洗板 4 次，徹底去除未結(jié)合游離雜質(zhì)。

所有非空白孔加入酶結(jié)合物工作液 100μL，封板避光，37℃條件下二次孵育 25min。

避光環(huán)境下每孔加入顯色混合底物液 100μL，輕晃酶標(biāo)板混勻，37℃避光反應(yīng) 12min，觀察顯色梯度。

加入終止液 50μL 終止酶促反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀吸光度，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算樣本內(nèi) u-T4 精準(zhǔn)含量。