本試劑盒采用高靈敏度雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理,酶標板包被高特異性大鼠U-TSH捕獲抗體,通過優(yōu)化抗體配對與反應體系,提升檢測靈敏度,加入標準品和待測大鼠血清樣本后,樣本中的微量U-TSH抗原與固相抗體特異性結合,洗板去除干擾雜質,加入高活性酶標檢測抗體形成免疫復合物,經(jīng)精準洗滌后底物顯色,顯色強度與U-TSH濃度呈正相關,終止反應后通過高精度標準曲線,定量檢測樣本中微量的U-TSH含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒
英文名稱:U-TSH ELISA Kit
貨號:Y-E1242
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:超高靈敏度,最低檢測限0.01mIU/L,可檢測大鼠極低濃度TSH
檢測范圍:0.02mIU/L~10mIU/L,覆蓋大鼠甲狀腺功能異常模型全濃度區(qū)間
反應時間:總時長130分鐘,抗體孵育100分鐘,顯色30分鐘
保存條件:2~8℃避光冷藏,全套試劑嚴禁冷凍、高溫放置
有效期:原裝有效期6個月,開封后20天內用完,保證超高靈敏度
顯色系統(tǒng):超高靈敏專用TMB顯色體系,低濃度樣本顯色無盲區(qū)
檢測波長:450nm精準檢測波長,570nm高精度校正
標準曲線繪制:8梯度超稀標準濃度,四參數(shù)擬合,R2≥0.998,超高擬合精度
特異性:專一識別大鼠U-TSH,與LH、FSH等垂體激素無交叉反應
重復性:板內CV≤3%,板間CV≤5%,重復性行業(yè)頂尖
注意事項:血清樣本無溶血、無脂血,保證超高精準度;實驗環(huán)境無粉塵、無污染;所有試劑精準配比;孵育時間、溫度嚴格標準化,細微偏差會影響微量檢測結果。
實驗前準備工作:

1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分(酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液)從 2~8℃取出,室溫(20~25℃)放置平衡 30min,嚴禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制:按標簽標注比例用去離子純水稀釋(常見 20× 濃縮液:1 份濃縮液 + 19 份純水),混勻備用,現(xiàn)配現(xiàn)用。
標準品復溶 / 梯度稀釋:
凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解,室溫靜置 10min,輕柔吹打混勻;
按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品,單獨標記,剩余原液分裝 - 20℃避光保存,避免反復凍融。
待測樣本預處理:血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋,渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清;溶血、脂血嚴重樣本棄用。
2. 耗材與設備準備
設備:恒溫 37℃孵育箱、酶標儀(450nm 主波長,630nm 參比)、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(或手動洗板槽)、封板膜、離心管。
耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染,移液槍提前校準。
取出本次實驗所需酶標板條,剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋,加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標記
酶標板做好分區(qū)標記:空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔(所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差)。
實驗步驟如下:

試劑盒全部試劑室溫平衡 40min,濃縮洗滌液 1:30 稀釋,大鼠血清無溶血、脂血,單次分裝使用。
高靈敏包被酶標板每孔精準加入 100μL 梯度 U-TSH 標準品、大鼠血清、空白稀釋液。
一步高親和力酶標記結合液 100μL / 孔,封板膜完全密封,37℃恒溫避光孵育 90min。
棄去全部反應液,洗滌液加滿微孔浸泡 50s,重復洗滌 6 次,吸水紙垂直用力拍干微孔內全部殘留液體。
避光環(huán)境加入高靈敏 TMB 顯色液 100μL,37℃避光精準顯色 22min,嚴控顯色時長避免信號過飽和。
每孔快速加入 50μL 專用終止液,水平輕晃酶標板 40s 充分中和顯色體系。
10min 內以 450nm 為主波長、600nm 為參比波長讀取各孔 OD 值,擬合標準曲線計算微量 U-TSH 濃度。
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關鍵字: 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素;U-TSH;ELISA試劑盒;
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