本試劑盒依托間接酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，將大鼠紅細(xì)胞特異性抗原包被于酶標(biāo)板微孔，封閉非特異性位點后加入待測樣本，樣本中的抗紅細(xì)胞抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗滌后加入HRP標(biāo)記二抗進(jìn)行免疫結(jié)合，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中抗紅細(xì)胞抗體含量呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算即可得到樣本中目標(biāo)抗體濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒

英文名稱：Rat anti-red cell
貨號：Y-E1013

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.15ng/mL

檢測范圍：0.3ng/mL - 18ng/mL

反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長110分鐘

保存條件：2-8℃冷藏避光保存，洗滌液室溫保存，冬季防凍

有效期：未開封有效期6個月

顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色，酸性終止液終止，顯色穩(wěn)定度高

檢測波長：450nm+630nm雙波長校準(zhǔn)檢測

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：六梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品，四參數(shù)擬合，擬合系數(shù)≥0.994

特異性：特異性結(jié)合大鼠紅細(xì)胞抗體，無血細(xì)胞同源蛋白交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8.5%，板間CV≤10.5%

注意事項：嚴(yán)禁溶血樣本檢測，會嚴(yán)重干擾實驗結(jié)果；樣本稀釋比例精準(zhǔn)，避免濃度偏差
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫平衡 26min，稀釋洗滌液，調(diào)配酶標(biāo)記應(yīng)用液。

標(biāo)記各孔組別，空白孔僅加稀釋液，其余孔加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品、對照及稀釋待測樣本，同步加酶液。

封板后 37℃孵育 62min。

洗板 6 次，每次浸泡 25s，倒出液體后拍干板條。

加入顯色 AB 液，避光顯色 13min。

滴加終止液終止酶反應(yīng)，混勻體系。

酶標(biāo)儀 450nm 檢測吸光度，換算樣本抗紅細(xì)胞抗體濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：