本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標(biāo)板固定大鼠C4a特異性抗體，待測(cè)大鼠樣本中的補(bǔ)體片斷4a抗原與固相抗體結(jié)合，經(jīng)酶標(biāo)記二抗顯色反應(yīng)后，檢測(cè)吸光度數(shù)值，吸光度與樣本C4a含量成正比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測(cè)過(guò)敏毒素C4a濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1282 |
英文名稱 | C4a ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤15pg/mL
檢測(cè)范圍：30pg/mL - 1000pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)130分鐘（樣本溫育70分鐘、酶溫育30分鐘、顯色30分鐘）
保存條件：2-8℃避光冷藏，洗滌液室溫密封保存
有效期：未開(kāi)封有效期6個(gè)月，開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng)：TMB顯色體系，酸性終止液終止反應(yīng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2≥0.990
特異性：特異性識(shí)別大鼠C4a補(bǔ)體片段，與C3a、C5a無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項(xiàng)：血清樣本新鮮分離，避免補(bǔ)體自發(fā)激活；樣本無(wú)細(xì)菌污染、無(wú)溶血
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫放置 34min，梯度稀釋 C4a 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)記酶標(biāo)板空白對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)梯度、大鼠血清樣本孔。
直接加樣 100μL 標(biāo)準(zhǔn)品與稀釋血清樣本至對(duì)應(yīng)孔，空白孔加入等量稀釋液。
覆膜封板，37℃孵育 81min，讓補(bǔ)體片段 C4a 與包被抗體結(jié)合。
棄凈液體，洗滌液加滿每孔靜置 38s，洗板 6 次，洗脫非特異性吸附蛋白。
所有檢測(cè)孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，避光 37℃孵育 36min。
加入顯色 AB 混合底物液 100μL，輕震混勻，避光顯色 19min。
終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 C4a 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a;C4a;ELISA試劑盒;
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