本試劑盒采用間接ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔包被大鼠黑色素細(xì)胞特異性抗原，待測(cè)大鼠樣本中的MC Ab可與固相抗原特異性結(jié)合，洗板后加入酶標(biāo)記抗大鼠抗體，催化底物顯色，吸光度與樣本中黑色素細(xì)胞抗體含量正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1280 |
英文名稱 | MC Ab ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)滴度≤1:20，最低蛋白濃度≤0.1U/mL
檢測(cè)范圍：0.2U/mL～10U/mL
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)110min，樣本孵育80min，顯色20min，讀數(shù)5min
保存條件：2～8℃避光冷藏，抗體試劑嚴(yán)禁室溫久置
有效期：未開封6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng)：HRP標(biāo)記抗體介導(dǎo)TMB顯色系統(tǒng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，630nm校準(zhǔn)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以標(biāo)準(zhǔn)抗體濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，四參數(shù)擬合，R2≥0.990
特異性：特異性識(shí)別大鼠黑色素細(xì)胞抗體，與其他皮膚組織抗體無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%
注意事項(xiàng)：血清樣本需無(wú)溶血、無(wú)脂血；孵育需保持濕度，防止孔板干孔；不同批次樣本統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)條件。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，稀釋 MC Ab 陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品建立梯度滴度，標(biāo)記酶標(biāo)板各檢測(cè)孔。
一步法直接上樣，標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 100μL，待測(cè)孔加大鼠血清稀釋樣本 100μL，空白孔加稀釋液。
密閉封板，37℃孵育 70min，讓血清內(nèi)黑色素細(xì)胞抗體與固相抗原結(jié)合。
棄凈液體，洗滌液加滿每孔靜置 33s，洗板 5 次，吸水紙拍干孔內(nèi)余液。
除去空白孔，加入羊抗大鼠酶標(biāo)二抗 100μL，避光 37℃孵育 28min。
加入 TMB 顯色混合液 100μL，輕震混勻，37℃避光顯色 14min。
終止液終止反應(yīng)，15min 內(nèi) 450nm 測(cè) OD 值，判定 MC Ab 抗體水平。
關(guān)鍵字： 大鼠黑色素細(xì)胞抗體;MC Ab;ELISA試劑盒;
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