本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè)原理，針對(duì)大鼠cGMP建立特異性檢測(cè)體系，固相載體包被cGMP偶聯(lián)抗原，樣本中的內(nèi)源性cGMP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，經(jīng)酶促顯色反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，吸光度與樣本cGMP濃度負(fù)相關(guān)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.05nmol/L

檢測(cè)范圍：0.1nmol/L～10nmol/L

反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)95min，孵育65min，顯色15min，讀數(shù)5min

保存條件：2～8℃避光冷藏，小分子試劑禁止冷凍

有效期：未開(kāi)封6個(gè)月，開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)有效

顯色系統(tǒng)：高靈敏小分子專(zhuān)屬TMB顯色系統(tǒng)

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋?zhuān)膮?shù)擬合曲線，R2≥0.990

特異性：特異性識(shí)別大鼠cGMP，不與cAMP等環(huán)核苷酸發(fā)生交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%

注意事項(xiàng)：樣本需新鮮制備，避免核苷酸降解；全程低溫操作，減少樣本損耗；試劑現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒室溫回溫 33min，復(fù)溶 cGMP 小分子標(biāo)準(zhǔn)品配制梯度稀釋液，規(guī)劃酶標(biāo)板孔位。

一步法直接加樣 100μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品與大鼠組織提取上清至對(duì)應(yīng)孔，空白孔添加稀釋緩沖液。

覆膜封板，37℃孵育 79min，固相載體捕獲小分子 cGMP。

傾倒廢液，洗滌液浸潤(rùn)每孔 37s，循環(huán)洗板 5 次，充分去除未結(jié)合游離小分子。

所有樣品孔加入 HRP 標(biāo)記特異性抗體 100μL，避光 37℃孵育 33min。

分加顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩后避光顯色 17min。

滴加終止液終止酶促反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀取 OD 值，換算樣本 cGMP 含量。