本試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，酶標(biāo)板包被cGMP特異性抗原，待測大鼠樣本中的cAMP與固相抗原競爭結(jié)合特異性抗體，后續(xù)酶標(biāo)抗體顯色，吸光度數(shù)值隨樣本cAMP含量升高而降低，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量大鼠環(huán)磷酸腺苷含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1578 |
英文名稱 | cAMP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.04nmol/L
檢測范圍：0.08nmol/L～12nmol/L
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長95min，37℃孵育65min，顯色15min，讀數(shù)5min
保存條件：2～8℃密封避光保存，避免溫度波動(dòng)
有效期：原裝6個(gè)月，開封后20天內(nèi)使用
顯色系統(tǒng)：小分子特異性TMB顯色體系，背景低、靈敏度高
檢測波長：450nm，630nm校準(zhǔn)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：多濃度梯度擬合，四參數(shù)回歸，R2≥0.991
特異性：精準(zhǔn)檢測大鼠cAMP，與cGMP、其他核苷酸無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.5%，板間CV≤9.5%
注意事項(xiàng)：樣本采集后快速處理，防止cAMP分解；避免強(qiáng)光、高溫環(huán)境操作；洗滌步驟輕柔充分。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，梯度稀釋 cAMP 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)記酶標(biāo)板標(biāo)準(zhǔn)梯度孔、大鼠胞內(nèi)提取液待測孔。
直接加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)液 100μL，待測孔加稀釋胞內(nèi)樣本 100μL，空白孔加入稀釋液。
密閉封板，37℃恒溫孵育 74min，完成 cAMP 抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。
棄凈液體，洗滌液注滿每孔靜置 32s，洗板 5 次，吸水紙拍干板內(nèi)殘留洗滌液。
除空白孔外加入酶聯(lián)檢測抗體工作液 100μL，避光封板孵育 29min。
加入顯色 AB 混合底物液 100μL，輕搖混勻，37℃避光顯色 15min。
終止液終止反應(yīng)，10min 內(nèi) 450nm 測定吸光值，計(jì)算 cAMP 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠環(huán)磷酸腺苷;cAMP;ELISA試劑盒;
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