本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，固相酶標(biāo)板固定大鼠EG-VEGF特異性抗體，樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的EG-VEGF抗原發(fā)生特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物，顯色后檢測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系定量檢測大鼠樣本中EG-VEGF的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
英文名稱：EG-VEGF ELISA Kit
貨號：Y-E1567
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤0.06ng/mL
檢測范圍：0.15ng/mL - 7ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長135min
保存條件：2-8℃避光密封保存，生長因子試劑低溫防降解
有效期：未開封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：VEGF家族特異性TMB顯色體系
檢測波長：450nm、620nm雙波長校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度標(biāo)準(zhǔn)品四參數(shù)擬合曲線，精準(zhǔn)定量
特異性：特異性結(jié)合大鼠EG-VEGF，與VEGF、PDGF等血管因子無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV＜7%，板間CV＜9%
注意事項(xiàng)：內(nèi)分泌樣本低溫凍存，避免因子失活；避免試劑反復(fù)凍融；洗滌充分，降低背景干擾
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
包被微孔板各孔上樣梯度標(biāo)準(zhǔn)品 54μL，內(nèi)分泌組織上清樣本 54μL，區(qū)分孔位組別。
加入酶結(jié)合物工作液 96μL，封板封口，37℃孵育 69min。
倒掉廢液，洗滌液浸泡 22s，拍干殘留液體，循環(huán)洗板 5 次。
避光滴加顯色 A、B 液各 50μL，混勻后暗處顯色 16min。
每孔加入終止液 50μL 終止反應(yīng)，晃動(dòng)板體混勻體系。
擦拭板底后酶標(biāo)儀 450nm 測定吸光度數(shù)值。
曲線擬合計(jì)算 EG-VEGF 濃度，分析內(nèi)分泌血管增殖因子水平。
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關(guān)鍵字： 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子;EG-VEGF;ELISA試劑盒;
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