本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理,酶標(biāo)板微孔固定抗大鼠AmAC-1特異性抗體,用于特異性捕獲樣本中的巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1抗原。孵育完成特異性結(jié)合后洗板,去除非特異性雜質(zhì),加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成免疫復(fù)合物,底物顯色強度與AmAC-1含量成正比。對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中AmAC-1的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1145 |
英文名稱 | AMAC-1 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測靈敏度0.1ng/mL,精準(zhǔn)檢測巨噬細胞活化相關(guān)微量因子。
檢測范圍:0.2ng/mL - 8ng/mL,適配大鼠巨噬細胞培養(yǎng)上清、炎癥組織、血清樣本。
反應(yīng)時間:全流程90分鐘,溫育60分鐘,顯色15分鐘。
保存條件:2-8℃避光冷藏,洗滌液室溫密封保存。
有效期:未開封有效期6個月,開封后30天內(nèi)使用。
顯色系統(tǒng):經(jīng)典TMB顯色系統(tǒng),梯度清晰,背景值低。
檢測波長:450nm單一波長檢測。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:四參數(shù)Logistic擬合,R2≥0.990。
特異性:特異性識別大鼠AmAC-1,無同類因子交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%。
注意事項:細胞上清樣本需無菌無雜質(zhì);避免樣本凍融;洗板徹底防止假陽性。
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑室溫平衡 27min,稀釋洗滌液,復(fù)溶 AmAC-1 凍干標(biāo)準(zhǔn)品并梯度稀釋,拆分酶標(biāo)板條備用。
空白孔添加稀釋緩沖液,標(biāo)準(zhǔn)孔依次加入梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL,樣本孔上樣 50μL 稀釋待測樣本。
全部孔位加入酶偶聯(lián)試劑 100μL,密封酶標(biāo)板,37℃孵育 58min。
洗板 4 次,浸泡 27s 每輪,甩干液體并拍干微孔。
避光添加顯色 A、B 底物各 50μL,37℃避光顯色 14min。
終止液 50μL 滴加至各孔終止反應(yīng)。
450nm 讀 OD 值,定量 AmAC-1 檢測結(jié)果。
關(guān)鍵字: 大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1;AmAC-1;ELISA試劑盒;
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