本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA經(jīng)典原理，酶標板微孔包被人P選擇素特異性抗體，加入標準品、血漿、組織待測樣本，樣本中的P-Selectin抗原與固相抗體特異性結合，洗滌去除未結合雜質(zhì)后，加入HRP標記的檢測抗體，形成特異性免疫復合物，經(jīng)顯色、終止反應后檢測吸光度，定量檢測樣本中P選擇素含量，評估血小板活化及炎癥血栓反應。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒
英文名稱：P-Selectin/CD62P/GMP140 Elisa Kit
貨號：Y-E119
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測值≤1.0pg/mL，可靈敏檢測血清、血漿中低豐度P-Selectin
檢測范圍：7.8-500pg/mL，適配人體炎癥、血栓相關樣本的濃度檢測需求
反應時間：標準實驗反應時長3h，分階段孵育，顯色反應穩(wěn)定可控
保存條件：全套試劑2-8℃避光保存，洗滌液可室溫短期放置，濃縮試劑使用前充分混勻，禁止凍存試劑盒主體組分
有效期：未開封有效期6個月，開蓋后試劑1個月內(nèi)用完，避免活性衰減
特異性：特異性結合人P選擇素，不與E選擇素、L選擇素等同類黏附分子發(fā)生交叉反應，特異性優(yōu)異
重復性：板內(nèi)變異系數(shù)＜8%，板間變異系數(shù)＜10%，批內(nèi)、批間檢測數(shù)據(jù)差異小
注意事項：實驗所用耗材需無酶、無污染，避免影響酶促反應；顯色液需現(xiàn)用現(xiàn)配，避光操作；樣本需離心去除雜質(zhì)、溶血樣本不可用于檢測，會干擾顯色結果；嚴格把控孵育溫度與時間，溫度偏差會直接影響檢測精度；廢棄試劑按生物實驗廢液規(guī)范處理
關鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫靜置 30min 復溫，稀釋濃縮洗滌液，溶解凍干標準品后進行倍比梯度稀釋，排布酶標板孔位。
空白對照孔加稀釋液，標準品孔加入不同濃度標準品，樣本孔加入抗凝處理后待測樣本，等量加樣。
直接向每孔加入酶標記抗體工作液，無需棄液，封板嚴實包裹酶標板。
37℃避光孵育 66min，全程密閉孵育，不得隨意開啟孵育箱。
撕除封板，倒扣排凈廢液，洗滌液浸泡微孔 36s，連續(xù)洗板 5 次，拍干微孔水分。
加入顯色液避光顯色 15min，最高濃度孔呈深藍色，低濃度孔顏色依次變淺。
加入終止液混勻，15min 內(nèi) 450nm 測 OD 值，換算樣本 P 選擇素濃度。
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關鍵字： 人P選擇素;P-Selectin/CD62P/GMP;ELISA試劑盒;
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