本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，以特異性山羊P選擇素單克隆抗體包被微孔板，樣本中的山羊P選擇素可與固相抗體特異性結(jié)合，再加入酶標記的檢測抗體形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)底物顯色、終止反應后，吸光度值與樣本中山羊P選擇素含量呈正相關(guān)，結(jié)合標準曲線可精準定量樣本指標含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測限0.05ng/mL，可精準檢測山羊血清、組織勻漿中微量P選擇素含量

檢測范圍：0.1ng/mL - 20ng/mL，覆蓋山羊生理、病理狀態(tài)下P選擇素表達濃度區(qū)間

反應時間：標準實驗時長100分鐘，分階段孵育，保障抗原抗體特異性結(jié)合

保存條件：2-8℃避光保存，濃縮洗滌液低溫易結(jié)晶，使用前溫水輕柔溶解即可，無需高溫加熱

有效期：未開封有效期12個月，定期儲存無失效、活性衰減問題

特異性：特異性識別山羊P選擇素，與山羊E選擇素、L選擇素及其他黏附分子無交叉結(jié)合反應

重復性：板內(nèi)變異系數(shù)≤4%，板間變異系數(shù)≤6%，檢測精度高、穩(wěn)定性好

注意事項：組織樣本需充分勻漿、離心取上清，避免雜質(zhì)干擾；所有試劑需混勻后使用，避免濃度不均；實驗過程避免強光直射酶標板，防止顯色底物降解。
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

所有試劑室溫放置 35min，配制洗滌液與樣本稀釋緩沖液，酶標板做好分組標記：空白孔、標準品梯度孔、山羊血漿待測樣本孔。

空白孔添加純稀釋液，其余孔分別加入不同濃度 P 選擇素標準品、離心預處理后的山羊血漿稀釋樣本，加樣時槍頭避免觸碰孔壁固相載體。

一步法一次性加入辣根過氧化物酶標記抗體工作液，封板密封后輕柔搖晃酶標板使體系混勻。

37℃水浴恒溫孵育 70min，保證固相抗體、樣本抗原、酶標抗體充分夾心結(jié)合。

棄液洗板，每孔注滿洗滌液浸泡 40s，反復洗板 6 次，每次在吸水紙上用力拍干微孔板。

每孔加入 TMB 顯色混合液，室溫避光顯色 20min，標準品由高濃度至低濃度藍色逐級遞減。

加入硫酸終止液終止顯色，混勻后立即上機測 OD 值，擬合標準曲線換算山羊樣本中 P 選擇素具體含量。