本試劑盒運用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心技術(shù)原理，在微孔板表面固定人促睡眠肽特異性捕獲抗體，待測樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的DSIP抗原可特異性結(jié)合固相抗體，孵育結(jié)合后洗去未結(jié)合物質(zhì)，加入酶檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物，底物在酶的催化下產(chǎn)生有色產(chǎn)物，終止反應(yīng)后測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算得出樣本中人促睡眠肽的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒
英文名稱：DSIP Elisa Kit
貨號：Y-E195
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低可測 3.5ng/L
檢測范圍：8ng/L - 320ng/L
反應(yīng)時間：包被孔樣本孵育 75min，酶結(jié)合物 40min，顯色 12min，總時長 127min
顯色系統(tǒng)：可溶性 TMB 底物顯色體系
檢測波長：450nm，參考 620nm
特異性：不與褪黑素、5 - 羥色胺發(fā)生交叉結(jié)合，同源肽交叉率＜3%
重復(fù)性：板內(nèi) CV≤7.0%，板間 CV≤8.5%
注意事項：全程避光操作顯色步驟，廢液按生物危害廢棄物處理，剩余試劑 2-8℃避光保存
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下：
試劑盒所有組分室溫放置 35min，配置洗滌工作液與標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，裁剪適配數(shù)量包被板條。
標(biāo)準(zhǔn)品孔添加不同濃度 DSIP 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測樣本按照說明書比例稀釋后上樣 50μL，空白對照孔加入緩沖稀釋液。
直接向全部微孔加入酶標(biāo)記二抗工作液 100μL，密封封板，低速震蕩混勻 20 秒。
37℃孵育箱密閉孵育 70min，杜絕環(huán)境光線干擾結(jié)合反應(yīng)。
棄去孔中反應(yīng)液，洗板機自動洗板 6 次，每次浸泡 35s，最后一次徹底拍干微孔內(nèi)水分。
每孔依次加入顯色液 A、顯色液 B 各 50μL，避光混勻，室溫避光顯色 20min。
滴加終止液終止酶促顯色，酶標(biāo)儀 450nm 檢測 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本促睡眠肽濃度。
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關(guān)鍵字： 人促睡眠肽;DSIP;ELISA試劑盒;
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